基因型:MATa, his3Δ200, trp1-901, leu2-3, 112, ade2, LYS2::(lexAop)4-HIS3, ura3::(lexAop)8-lacZ, ade2::(lexAop) 8-ADE2, GAL4
用途:
筛选跨膜蛋白间相互作用的DUAL membrane系统酵母菌株。
pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。-80℃可保存三个月。
操作方法:
1. 取100 µl冰上融化的AH109感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA (95-100度5 min,快速冰浴,重复一次) 10 µl,PEG/LiAc 500µl并吸打几次混匀,30度水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
2. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。
4. ddH2O 50 µl重悬,涂板,29℃培养48-98 h。
象形图 |
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警示语 |
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Class |
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警告声明 |
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UNub |
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危险声明 |
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Packing Group |
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