基因型:E. coli B F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2 (CamR)。
用途:Cpn10和Cpn60伴侣蛋白在4-12℃表现出较高活性,在ArcticExpress(DE3) pRARE2细胞中表达时,可降低重组蛋白包涵体的形成,增加可溶重组蛋白的表达量及生物活性,比传统的原核表达伴侣蛋白GroEL、GroES等具有更加优异的促融能力。pUC19检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
使用步骤:
1. 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰水中水浴5分钟直至菌块融化,加入质粒或连接产物并用手拨打EP管底轻轻混匀(禁止用枪吸打),冰水水浴30分钟。
2. 42℃水浴热激45s,迅速放回冰中并静置2分钟,禁止摇晃,否则会降低转化率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (SOC或LB),混匀后37℃,2000 rpm 摇菌培养60分钟。
4. 取所有的菌悬液涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5. 将平板倒置放于35-37℃培养箱过夜培养。
象形图 |
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警示语 |
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Class |
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警告声明 |
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UNub |
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危险声明 |
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Packing Group |
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