（1）配制叶酸标准储备液(20.0ug/mL):精确称取20.0mg叶酸标准品,用氢氧化钠乙醇溶液溶解并转移至1000mL容量瓶中,定容至刻度。
（2）叶酸标准储备液浓度标定:准确吸取1.0mL标准储备液至5mL容量瓶中,用氢氧化钠溶液定容至刻度。用紫外可见分光光度计,于比色杯厚度1cm,波长256nm条件下, 以氢氧化钠乙醇溶液调零点，测定3次标准溶液吸光度值,取平均值按下面计算叶酸标准储备液浓度。标定好的叶酸标准储备液储存于棕色瓶中,于2-4℃冰箱可保存两年。
（3）叶酸标准中间液(0.200 μg/mL):准确吸取1.00 mL叶酸标准储备液置于100 mL棕色容量瓶中,用氢氧化钠乙醇溶液稀释并定容至刻度,混匀后储存于瓶中2-4℃冰箱可保存1年。