2×pfu PCR MasterMix 产品包装: 目录号 包装 2×pfu PCR MasterMix(不含染料) RTH3103-02 500μl RTH3103-03 5×500μl 2×pfu PCR MasterMix(含染料) RTH3104-02 500μl RTH3104-03 5×500μl 注:以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。 储存条件: -20℃可长期保存;4℃稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。 产品简介: 本产品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。用于高保真的DNA片段的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物为平滑末端,不可以直接用于TA克隆,要通过平滑末端克隆法进行克隆。 质量控制: 以λ DNA为模板,可以很好扩增5kb的DNA片段;以水稻基因组为模板,可以很好扩增3.2kb的DNA片段。 使用说明: 1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。 2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系: 50μl反应体系 终浓度 2×MasterMix 25μl 1× 上游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM 下游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM 模板 × μl 10pg-1μg 水 补至50μl 3. 快甩离心将反应液收集到管底。 4. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。 5. PCR仪上执行以下程序: 步骤 温度 时间 循环数 初始变性 94℃ 5 min 1 变性 94℃ 30 sec 25-40* 退火 Tm-5℃* 30 sec 延伸 72℃ 0.5kb/min 最后延伸 72℃ 5 min 1 *注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。 6. 电泳检测。 注:使用含染料的2×MasterMix可以直接上样;不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。 1% agarose gel,RealSafe Red stainlane 1: 1800bp,Rice fragementlane 2: 1000bp, plasmid fragementlane 3: 500bp, plasmid fragement
象形图 |
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警示语 |
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Class |
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警告声明 |
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UNub |
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危险声明 |
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Packing Group |
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暂无说明书!