商品详情:产品简介:10×Western转膜液可以用于Western时湿法电转膜,使用前需配制成1×Western转膜液。本转膜液不含甲醇和SDS,无需调节pH值。 使用方法(仅供参考):一、1×Western转膜液配制方法:量取100 ml 10×Western转膜液,然后按照下表配制 1×Western转膜液:目的蛋白添加量无水甲醇SDS变性蛋白<20 kD蛋白20%0.01%20-80 kD蛋白10%0.05%>80 kD蛋白10%(NC膜)0.10%0-5%(PVDF膜)非变性蛋白<20 kD蛋白5-10%0.01%20-80 kD蛋白0-5%0.05%>80 kD蛋白0%0.10%加入超纯水,定容至1 L,无需调节pH,pH~8.3 注:甲醇和SDS在转膜中有拮抗作用。甲醇使蛋白更加结合在膜上,而SDS让蛋白更加离开膜。因此对大蛋白转膜来说,多加SDS,少加甲醇;而对小蛋白转膜,多加甲醇,少加SDS。二、转膜:1、膜的选择:转膜可以选择PVDF膜或NC膜。根据蛋白大小选择膜的孔径。一般说来,大于20 kD蛋白选择0.45 μm孔径,低于20 kD选择0.22 μm孔径。PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿活化。2、三明治结构:制作三明治时,将膜置于转膜夹芯正极一侧,凝胶置于转膜夹芯负极一侧,这样凝胶上带负电荷的蛋白才能转移到膜上。蛋白转膜三明治结构如下:负极(电转夹黑色面)-海绵垫-滤纸-凝胶-膜-滤纸-海绵垫-正极(电转夹白色面)3、转膜条件:以下转膜条件仅供参考,请根据目的蛋白确定最佳的转膜条件。膜孔径蛋白大小稳流建议时间降温措施0.22 μm低于20 kD200 mA~30分钟不需要0.45 μm20-50 kD300 mA~45分钟需要0.45 μm50-200 kD350 mA~50分钟需要0.45 μm高于200 kD350 mA~2.5-4.5小时需要 注意事项:1、转膜液如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。2、1×Western转膜液建议现用现配,不建议保存。3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 保存条件:常温保存,有效期两年。
货号
BL1312A
规格
500ml
品牌
Biosharp
象形图 |
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警告声明 |
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危险声明 |
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